为了了解宁夏中部和南部牛支原体的感染情况和遗传变异，采用PCR方法对宁夏中部和南部9个县级农场、屠宰场和交易市场的495份牛鼻拭子样本进行了检测、分离和鉴定。结果表明，495份样本中，PCR59份阳性，总阳性率为11.92%，9个县的阳性率为1.82%～21.82%，大型养殖场、屠宰场和交易市场的阳性率分别为11.11%、13.33%和12.59%。共分离出16株疑似牛支原体菌株，用oppF基因特异性引物扩增、测序和比较，并建立了分离株系统发育树，结果4株被鉴定为牛支原体。利用分离的株16S　rRNA序列和支原体代表菌株进一步构建了系统发育树。结果表明，分离菌株与国际标准菌株pg45和宁夏菌株Ningxia－1的亲缘关系最为密切。药敏试验发现，分离出的菌株对苯唑西林、链霉素、环丙沙星、多黏菌素B、阿莫西林、哌拉西林、头孢唑林和氨苄西林不敏感。结果表明，牛支原体在宁夏中部和南部流行，流行菌株没有很大的遗传变异，但对某些抗生素具有耐药性。建议加强牛支原体病的预防和控制。在临床预防和控制中，应联合用药，选择敏感药物，并使用适当的联合和穿插药物，以避免耐药性。本研究为牛支原体病的防治和临床用药提供了参考。