靶向单纯疱疹病毒1型HSV-1的活性小分子化合物的筛选及鉴定
作者:蒋佩文; 廖玉娇; 余欢; 汪林; 黄敏; 吴泳洁; 李润滋; 李敏惠
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目的筛选抗单纯疱疹病毒1型(Herpessimplexvirustype1、HSV-1)的双向小分子活性药物或促进HSV-1在肿瘤细胞中的复制,为抗病毒药物研发或溶瘤病毒联合治疗奠定研究基础。方法通过PCR扩增对产物进行测序,以确定受试的病毒和HSV-1F株。HSV-1号的效价采用TCID50法测定。建立了病毒核酸RT-qPCR检测系统。通过细胞增殖抑制实验和RT-qPCR检测系统筛选出具有促进LN229细胞HSV-1复制活性的化合物。用流式细胞仪分析化合物,并用抗HSV-1筛选出减菌斑化合物。结果PCR扩增和产品测序结果确定受试病毒为HSV-1F株。成功建立了高灵敏度的病毒核酸RT-qPCR检测系统。复合物佛司可林可以配合HSV-1抑制LN229细胞的扩散,促进HSV-1复制相关基因ICP4、UL12和Us6的表达。复方盐酸石蒜碱能抑制HSV-1诱导的细胞凋亡,减少空点数量,缩小空点大小。结论佛司可林具有促进肿瘤细胞HSV-1复制相关基因表达的活性,有望成为HSV-1溶瘤联合治疗的候选药物。盐酸石蒜碱可以降低HSV-1诱导的细胞凋亡率和病毒的空斑数量,具有潜在的反俄作用。