负载外泌体的3D明胶细胞外基质水凝胶促进皮肤损伤愈合
作者:凌华军; 崔瑞文; 王其友
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背景:细胞外基质水凝胶的应用可以有效地输送外质体,并与周围皮肤组织连接,有利于皮肤损伤的修复。目的:探讨载骨髓间充质干细胞分泌物的3D明胶对皮肤损伤的影响。方法:从超速离心法提取大鼠骨髓,从间充质细胞和上清液提取外体。(1) 制备甲基丙烯酸改性明胶凝胶,加入外显体和光引发剂,在紫外光下交联,形成装载外显体的3D明胶细胞外基质水凝胶。(2) 将成纤维细胞接种于3D明胶细胞外基质 水凝胶上,分别装载外显体和普通培养板,接种12小时后,用划痕试验观察细胞迁移。(3) 在20名成年SD大鼠人背部造成了直径为1cm、深度为0.2cm的皮肤损伤伤口。实验组(n=10)覆盖3D细胞外基质水凝胶,装载外显体,对照组(n=10)覆盖生理盐水,最后覆盖无菌纱布。术后2周,用巴氏染色和马松染色观察损伤皮肤的结构变化和胶原沉积。结果与结论:(1)划痕试验表明,在细胞外基质水凝胶负载外质体的成纤维细胞迁移能力强于普通培养板。(2) 动物实验中苏木精-伊红染色显示对照组皮肤组织结构不同程度破坏,炎性细胞数量增加。实验组皮肤组织结构相对完整,细胞数量明显增多,微血管结构清晰可见,密度增加。(3) 动物实验马松染色显示,实验组皮肤组织中有大量规则排列的胶原纤维,而对照组只有少量胶原纤维,呈稀疏结构。(4) 结果表明,含有骨髓间充质干细胞外显体的三维明胶-细胞外基质水凝胶凝胶有助于皮肤损伤的愈合,这可能与外显体促进皮肤迁移有关。