转BpTCP10基因抑制表达白桦的耐盐性分析

作者:李芳蕊; 许思佳; 刘霁广; 向泓霖; 张家伟; 崔帅; 丁一淇; 李慧玉
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【目的】TCP家族基因是植物特有的转录因子,广泛参与植物的各种生命过程,起着重要的调控作用。白桦的BpT-CP10基因是TCP家族的一个重要基因。探索BpTCP10基因在白桦生长发育和非生物胁迫中的作用,可以为揭示该基因的功能和培育白桦耐盐品种提供理论依据。[方法]以白桦为试材,在BpT克隆CP10基因的基础上,进行生物信息学分析和启动子元件分析,研究该基因的时空表达特征。同时,利用cres-t技术构建了植物抑制表达载体。通过农杆菌介导法获得了具有抑制性表达的转基因白桦菌株。形态学分析在转基因株系进行,采用小叶盘法进行,NaCl胁迫后,测量胁迫处理各时间点的转基因菌株超氧化物歧化酶和过氧化氢的含量,并在NBT通过染色分析DAB和耐盐性。[结果]白桦Aristole 10基因包含高度保守的b HLH结构域基因,属于TCP家族中的PCF和亚类基因,与拟南芥AtTCP11基因有一定的遗传关系,BpTAristole 10基因启动子上存在多个应激反应元件。QRT PCR结果显示,BpT的CP 10基因在叶片、茎节、顶芽、雄花序和雌花序中均有不同程度的表达,该基因与Na Cl等非生物胁迫以及ABA和JA的反应有关。在转基因株系进行NaCl处理后,超氧化物歧化酶和过氧化氢的DAB和NBT染色和含量测定表明,转基因系对盐敏感。[结论]白桦Aristole 10基因可能参与白桦茎节发育和非生物胁迫反应。