地舒单抗对人脐带间充质干细胞增殖及成骨分化的作用研究
背景地舒单抗是一种抑制破骨细胞脉的RANKL抑制剂药物。人类脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)具有成骨分化能力。两者的结合是否可以用来治疗股骨头坏死仍不确定。目的研究舒单抗对人脐血间充质干细胞增殖和成骨分化的影响。方法体外培养人脐血间充质干细胞,取生长良好的第三代人脐血间充质干细胞进行实验。以不同浓度(0.6 mg/ml、0.06 mg/ml、0.006 mg/ml)的DesumabhUC-MSCs成骨诱导分化培养基干细胞为实验组,不含Desumab的hUC-MSCs成骨诱导分化培养基干细胞为对照组。CCK-8法检测各组细胞的增殖活性。用茜素红染色法和碱性磷酸酶染色法分别检测各组细胞的成骨分化能力。通过实时荧光定量聚合酶链反应(QRT PCR)(RUN(X-2)和m RNA)检测各组细胞中与碱性磷酸酶(ALP)、锌指结构转录因子(OSX)、型胶原酶(COL)和Runt 2相关的转录因子。结果HUC-MSCs能表达干细胞表面标志蛋白,具有三系分化能力。与对照组相比,不同浓度(0.6mg/ml、0.06mg/ml、0.006mg/ml)的di-aristole均能促进HUC-MSCs的增殖,结果有统计学意义(P<0.05)。当舒单抗浓度为0.006mg/ml时,ALP/OSX/COL-I/RUNX-2HUC-MSCs的表达高于对照组(P<0.05)。0.006mg/ml地单抗处理的HUC-MSCs的成骨分化能力高于对照组(P<0.05)。随着浓度的增加,hUC-MSCs的成骨分化能力低于对照组(P<0.05)。结论0.006mg/ml的局部舒单抗浓度可促进HUC-MSCs的增殖和成骨分化。高浓度(0.6 mg/ml,0.06 mg/ml)的地苏单抗可抑制HUC-MSC的成骨分化。