Par3在成牙本质细胞胞间连接及其生物学功能中的作用研究

作者:王珏钰; 肖敏; 白玉; 程小刚; 吴昊泽; 况金鑫; 余擎
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目的:研究分离缺陷基因3(partitioning defective-3,Par 3)对小鼠成牙本质细胞系细胞(OLCs)细胞间连接的调控作用及相关生物学效应。方法:采用免疫荧光法观察Par 3在大鼠牙髓和小鼠成牙本质细胞中的表达和分布。Western blot检测炎症状态下成牙本质细胞中Par 3的表达。小干扰RNA(siRNA)下调成牙本质细胞中Par 3的表达后,用透射电镜观察Par 3表达下调前后小鼠成牙本质细胞间连接结构的变化。采用Western blot和细胞免疫荧光技术检测Par 3表达下调前后细胞紧密连接相关分子ZO-1(本草)的表达和分布。最后,Transwell和流式细胞术通过EdU(5-乙炔基-2’-deoxyuridine)研究了Par 3下调对成牙本质细胞生物学功能的影响,如增殖、迁移和凋亡。结果:Par3与成牙本质细胞在大鼠牙髓中的分布一致。体外培养的于成牙本质细胞胞浆中表达Par 3,炎症状态下表达水平降低。在Par 3表达下调后,小鼠成牙本质细胞的细胞间连接不连续,紧密连接相关蛋白ZO-1表达下调,其分布从细胞膜转移到细胞质。与对照组相比,Par-3下调组的细胞增殖和迁移能力增强,枯萎能力受到抑制。结论:Par 3表达下调可通过影响成牙本质细胞的表达/分布而破坏小鼠成牙本质细胞的细胞间连接,并通过促进细胞增殖和迁移而增强细胞的修复能力。