建立一种新的衍生化方法，结合二维液相色谱系统，对所有氨基酸特殊医疗用途水解配方中的牛磺酸进行精确定量。奶粉基质溶解在超纯水中，蛋白质通过亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀，衍生出高质量浓度的30mg／mL丹磺酰氯，衍生环境在有机碱三乙胺调整，然后在60水浴中加热1h。衍生液在Agilent-XDB－C18色谱柱上以甲醇和0.1%三氟乙酸为一维流动相分离，并锁定牛磺酸峰时间。通过柱切换技术，在捕获和中央切割后，将其切换到热accucoretmpfp色谱柱。二维分析在流动相用乙腈和0.1%甲酸进行，定量分析在荧光检测器进行。研究不同衍生浓度、衍生液、pH值、衍生时间和二维液相色谱条件对ALP回收率的影响，并优化其条件。所建立的方法确保了牛磺酸在1.0~20.0mg/L范围内具有良好的线性，线性相关系数（R2）为0.9996。企业提供的实际样品平均值在回收率为95.2%，在相对标准偏差为1.86%。本试验方法准确度高，抗干扰能力强，克服了整个氨基酸水解配方中其他氨基酸对目标物质衍生的影响，提高了衍生效率。解决了国家标准不能准确量化特殊医疗用途奶粉中牛磺酸含量的问题。它被AOAC委员会认可为检测特殊奶粉基质中牛磺酸含量的推荐方法。