西洋参中8个bHLH类转录因子的克隆及表达分析
作者:陈景鲜; 卢超; 郑钧屏; 杨玉珍; 张丽萌; 李玉华; 田云芳
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从西洋参cDNA克隆了八个bHLH类转录因子,并研究了它们在响应茉莉酸甲酯信号时的表达。在本研究中,从培养3周的西洋参幼苗中克隆了八个bHLH类转录因子。高效液相法和分光光度法分别测定了经MeJA不同时间处理的西洋参和不定根的人参皂苷Rg1、Re、Rb1号和总皂苷的含量。实时荧光定量PCR用于检测MeJA治疗后8种转录因子的表达。结果表明,从西洋参cDNA克隆的八个bHLH转录因子序列(pq-bhlh21~pq-bhlh28)的长度为762~2013 BP。8个转录因子的氨基酸序列一致性为24.90%。每个氨基酸序列都显示出基本的bHLH保守特征,属于bHLH超基因家族。来自Pq-bHLH22和pq-bhlh24~Pq-bHLH27的五个氨基酸序列包含bHLH-MYC N结构域,它属于bHLH基因家族中的MYC类转录因子。在MeJA治疗的48小时内,发现了8种转录因子的反应。在MeJA治疗72小时后,Pq-bHLH24的基因表达达到治疗组最高水平的106.53倍。在相关性分析,pq-bhlh25、Pq-bHLH27和Pq-bHLH28表现出强烈的协同趋势。Pq-bHLH21可能参与Rb1号生物合成途径的调控,而Pq-bHLH22、pq-bhlh25和pq-bhlh28三个转录因子与皂甙Re生物合成途径显著相关。上述研究为进一步研究BHLH转录因子的功能验证对人参皂苷生物合成的调控奠定了基础。