天然产物作为一种来源广泛、功能位点丰富的绿色低毒单体，在色谱固定相的开发中得到了广泛的应用。以天然可再生资源-腰果酚为配体，将其一步接枝到开环反应改性的缩水甘油醚氧丙基三甲氧基硅烷（KH－560）硅胶上，制备了腰果酚-键合硅胶固定相。通过傅里叶红外光谱、元素分析、热失重分析和氮、吸附和解吸实验对固定相进行了表征。结果表明，成功制备了腰果酚键合硅胶色谱固定相。使用烷基苯、多环芳香烃的Tanaka实验试剂、酚类化合物和芳香族位置异构体作为探针，评估其分离性能和保留机制，并与C18柱进行比较。研究发现，腰果酚键合固定相除了疏水性外，还具有氢键和氢键。基于上述保留效应，腰果酚-键合硅胶固定相对测试探针显示出良好的分离性能。重复注射10次。每个探针在RSD的保留时间为0.052%~0.079%，在峰面积为0.104%~0.847%，在RSD为0.081%~0.272%，表明色谱柱具有良好的重复性和稳定性。此外，腰果酚键合硅胶色谱柱对中药喜树果和吴茱萸的粗提物具有良好的分离性能，证明了其在实际样品分析中的巨大潜力。利用天然产物腰果酚制备色谱固定相，为喜树碱和吴茱萸的分离纯化提供了一种新方法，扩大了腰果酚在色谱分离材料中的应用。