CRISPR／Cas9基因编辑技术具有操作简单、成本低、编辑效率高等优点。它已被广泛应用于动物、植物和微生物的基因编辑研究。在这个技术体系中，由Cas9蛋白和guideRNA（gRNA）组成的核糖核蛋白复合体，即RNP（ribonucleoprotein）复合体，起着核酸剪切的作用。目前，将体外组装的RNP复合物直接导入受体细胞进行基因编辑的研究越来越多，已成为提高编辑效率、降低成本的有效手段。本研究的目的是获得具有高剪切活性的RNP杂岩。Cas9蛋白在大肠杆菌BL21成功表达（DE3），重组Cas9蛋白通过His－tag亲和树脂纯化。同时，利用T7转录试剂盒对g　RNA进行体外转录和纯化，使纯化后的Cas9蛋白和gRNA自发组装成RNP复合物，经体外活性检测，RNP复合物具有良好的DNA双链剪切活性。它与donor·DNA一起被转化到黑曲霉菌株，成功地敲除了目标蛋白，编辑效率超过90%。本研究获得的RNP复合物可应用于丝状真菌的基因编辑，节省了测试时间和成本，促进RNP介导的基因编辑技术在更多领域的应用。