一株跨种裂解李氏杆菌噬菌体的分离鉴定
作者:李天昊; 赵学慧; 宋晨; 委慧玲; 齐玉梅; 田常青; 祁国军; 史文静; 苟惠天; 薛慧文
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本研究的目的是获得天然李斯特菌噬菌体,为李氏杆菌病新生物制剂提供预防和治疗,减少抗微生物药物的使用,抑制病原体耐药性的产生。以单核细胞李氏杆菌人为宿主菌,对屠宰场污水进行筛选,获得噬菌体,通过透射电镜观察,通过生长特性(温度、pH、一步生长曲线、最佳感染数、有机溶剂的影响)检测,通过基因组酶消化鉴定,并由全基因组测序进行分析。在分离的单核细胞李斯特菌噬菌体中,选择了一种具有强切割能力和遗传稳定性的噬菌体进行后续试验,并命名为LP8。电镜观察表明,该噬菌体为肌枕科噬菌体,能跨种切割18株单核细胞李斯特菌和5株契诃夫斯基李斯特菌。确定LP8最适感染数为1,最适生长温度为45,最适pH为7。在这六种有机溶剂中,只有异戊醇能够导致在LP8失去活动。提取的基因组经酶消化鉴定为双链DNA.LP8全基因组测序。结果表明,基因组大小为87038bp,包含120个编码基因,编码基因累计长度为76326bp,编码基因平均长度为636bp,编码区长度占基因组的87.69%。本实验分离并制备了单核细胞增生李斯特菌噬菌体,并对其噬菌体能力和应用价值进行了鉴定。与李氏杆菌噬菌体相比,分离的LP8噬菌体具有更强的切割能力和更广泛的环境适应性。为后续建立单核细胞增生李斯特氏菌噬菌体噬菌体库和在实验室中应用单核细胞增生李斯特氏菌噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体库奠定了良好的基础。