甘蓝型油菜抗草甘膦基因遗传转化及抗性鉴定

作者:杜帅; 万丽丽; 王转茸; 徐义; 洪登峰; 杨光圣
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为了在甘蓝型油菜独立培养抗除草剂能力,I.variabilis-EPSPS*基因是从细菌(Isotericola variabilis)中克隆出来的,以使油菜具有抗药性。变异伊蚊EPSPs通过农杆菌介导法转移到甘蓝型油菜自交系127,获得variabilis-EPSPS*基因单株E1伊蚊。草甘膦的耐受性结果表明,转基因I.variabilis-EPSPS*基因T1一代可以在不同浓度的草甘膦培养基中正常生长,而非转基因对照的生长受到严重阻碍。i、 变异株EPSPs已成功整合到油菜基因组中,并能稳定遗传。在草甘膦治疗后,表达增加,在草甘膦浓度变化时,表达保持稳定。转化为I.variabilis-EPSPS*基因E1的T1植株在温室中用41%草甘膦异丙胺盐商业制剂(农达)600倍稀释(田间生产推荐中剂量的1/3)处理。莽草酸体内的累积数量远低于非转基因。通过对转基因植株对角线果长、单果重、千粒重等农艺性状的调查,发现转基因植株与对照植株之间没有显著差异。田间向农达喷洒了400次(田间生产推荐中剂量的1/2),发现转基因E1T1植物生长正常,而所有对照都死亡。鉴于变异瓢虫EPSPs*基因在转基因油菜的稳定遗传和油菜对除草剂的抗性,认为该抗性基因是一个新种质。