以叶酸和N-（膦酰基甲基）亚氨基二乙酸为原料，制备了氮含量高（10.0%）和荧光量子产率含量高（23.64%）的N，p-CDs。由于Hg2＋和N，p-CDs之间的电子转移，N，p-CDs的荧光将被猝灭。在此基础上，构建了半胱氨酸／同型半胱氨酸（Cys/Hcy）增强型纳米探针。Hg2＋和硫醇基团之间较强的相互作用被用于检测Cys/Hcy。Cys的测定在0.1~150 mol/L范围内呈线性关系，Hcy的测定在0.1~100 mol/L范围内呈线性关系，检测限的测定在30 nmol/L和50 nmol/L范围内呈线性关系。此外，本文制备的N，p-CDs具有较强的抗基体干扰能力，可用于自来水和尿液等实际样品的检测。由于其超低的细胞毒性和良好的细胞通透性，可用于活细胞中Hg2＋／Cys的检测，在生物传感器中具有广阔的应用前景。