基于酰胺化的化学标记技术在磷酸化多肽分析中的应用
作者:邹伦妃; 张启伟; 肖琛; 熊淼; 郑琦
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蛋白质的翻译后修改是复杂多样的。由激酶和磷酸酶调节的磷酸化是最广泛和重要的翻译后修饰之一。定量分析磷酸化蛋白质的动态变化有助于阐明磷酸化修饰调节生命活动的机制,了解其在生物功能实现中的作用。以质谱为核心的分析方法是翻译后修饰研究中最常用的定量技术,主要包括无标记定量技术、内标绝对定量技术、化学标记技术等。本文将蛋白质糖基化的标记分析方法应用于磷酸化肽的研究。酰胺化羧基可以提高磷酸化肽在TiO2的富集特异性和液相色谱-质谱(LC-MS)的灵敏度。稳定同位素标记实验表明,该方法适用于高通量磷酸化肽的相对定量分析。源自二甲胺的化学标记方法在磷酸化肽的质谱分析中具有优势,有望成为生物组织中磷酸化蛋白质研究的有力工具。